《中国动物检疫》由中华人民共和国农业农村部主管、中国动物卫生与流行病学中心主办,是我国兽医管理领域唯一的国家级指导性科技期刊。本刊曾于1992年、2004年被列入“中文核心期刊”,2014年被列入“中国农业核心期刊”。本刊以竭诚服务兽医行业为宗旨,以宣传行业政策法规、推进理论创新、推动科技进步、提升行业队伍工作水平为目标。栏目设有:权威论坛、流行病学、动物检疫、公共卫生、监督执法、兽医管理、技术支撑、专论综述、百家争鸣等。本刊已被“中国学术期刊网络出版总库”(知网)、《中国核心期刊》(遴选)数据库(万方)、《中文科技期刊数据库》(维普)、“超星期刊域出版平台”(超星)收录。

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    2020,37(2), DOI:
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    冠状病毒(Coronaviruses)在分类地位上属于套式病毒目(Nidovirales)冠状病毒科(Coronaviridae)正冠状病毒亚科(Orthocoronavirinae),包括α、β、γ和δ等4个属,可感染包括人类在内的多种动物。其中,α冠状病毒属主要感染人和猪、犬、猫、蝙蝠等,β冠状病毒属主要感染人和牛、马、猪、鼠、蝙蝠等哺乳动物,γ冠状病毒属主要感染鸡、火鸡、鸭、鹅等禽类,δ冠状病毒属主要感染野禽和猪。引起此次新型冠状病毒肺炎疫情的病毒(2019-nCoV)属于冠状病毒科β冠状病毒属。可感染禽类的冠状病毒主要来自γ冠状病毒属和δ冠状病毒属。鸡传染性支气管炎病毒(IBV)等家禽中分离到的冠状病毒均为γ冠状病毒属。家禽冠状病毒感染危害较大的是IBV。此外,鸭冠状病毒、鹅冠状病毒和鸽冠状病毒等在家禽中也有检出。一些野禽可感染δ属冠状病毒(如鹅口疮冠状病毒HKU12等)。2013年以来,中国动物卫生与流行病学中心对全国17省份共计5 249份家禽样品进行了禽源冠状病毒检测,共检测到IBV 446株,新型鸭冠状病毒和新型鸽冠状病毒等新型禽冠状病毒共277株,IBV、新型鸭冠状病毒、新型鸽冠状病毒的检出率分别为8.50%、2.04%、3.24%。对2019-nCoV与禽源冠状病毒的亲缘关系进行分析发现,2019-nCoV与已知的禽源冠状病毒核苷酸同源性较低;基于冠状病毒1ab基因保守区域的进化分析表明,2019-nCoV与禽源冠状病毒亲缘关系较远。基于上述分析,初步排除2019-nCoV来源于已知家禽冠状病毒的可能性。
    摘要:
    为尽快实现上海崇明奶牛布鲁氏菌病和牛结核病(以下简称“两病”)区域净化示范区净化目标,通过建立奶牛场“两病”输入性风险评估和内部风险评估模型,结合奶牛场“两病”流行史,构建了上海市规模化奶牛场“两病”风险评估分级体系;应用该体系将奶牛场划分为高、中、低风险场,为实施分类管理策略奠定基础。运用该体系,对上海市崇明区奶牛场每年开展1次“两病”风险评估分级。经过连续3年的风险分级与管理,崇明区奶牛场的“两病”净化效率得到极大提高,并使崇明奶牛“两病”区域净化示范区顺利通过国家验收,表明该体系符合上海市奶牛“两病”净化工作实际。
    2020,37(2):10-14, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.02.003
    摘要:
    2018年11月29日,天津市某猪场报告发生疑似非洲猪瘟疫情,病猪出现食欲不振、体温升高等症状并发生急性死亡。经国家外来动物病研究中心实验室确诊,判定为非洲猪瘟疫情暴发。接到报告后,流行病学调查组专家立即进行紧急流行病学调查,通过现场问卷调查、座谈交流、实验室检测和数据分析等方法,描述疫情的三间分布,找出风险因素,推断暴发原因,并提出防控建议。根据非洲猪瘟病毒传播特性,结合现场调查、实验室检测和数据分析结果,推断饲喂含有猪肉香肠制品的厨余垃圾是引发本次疫情的重要风险因素,但也不能完全排除人员、车辆带毒传播的可能性。本次疫情处置得当,未发生病原扩散,并得到有效控制。本次疫情调查确证了严禁饲喂厨余垃圾,加强运猪车辆管理与消毒对于非洲猪瘟防控的重要意义。
    2020,37(2):15-18, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.02.004
    摘要:
    为了解当前云南省普洱市猪伪狂犬病野毒感染情况,2017—2018年在普洱市10个县(区)的490户散养户和71个规模场,采集2 035份猪血清样品,采用gE-ELISA方法进行猪伪狂犬病病毒gE抗体检测。结果显示:普洱市猪伪狂犬病病毒gE抗体平均阳性率为1.92%,其中规模场为2.26%,散养户为1.77%,种猪群为3.41%。数据统计分析发现:规模场和散养户的伪狂犬病野毒感染率差异不显著(P>0.05),而冬春季节与其他季节、10月龄以上与以下的感染率差异均显著(P<0.05)。综上,目前普洱市猪伪狂犬病野毒感染程度较轻,感染范围较小,但仍需加强防控,尤其是冬春季节和种猪群。本研究基本摸清了普洱市猪伪狂犬病的流行状况、流行范围以及高发季节和高风险猪群,从而为当地猪伪狂犬病净化策略的制定和实施提供了依据。
    2020,37(2):19-23, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.02.005
    摘要:
    为准确分析当前形势下非洲猪瘟(ASF)传入山东省青岛市的可能性,参照世界动物卫生组织(OIE)风险分析方法,分析生猪及其产品调运、运输车辆和人员消毒、生猪养殖、相关场所生物安全、ASF实验室检测、病死猪无害化处理和餐厨垃圾处理等数据信息,评估ASF传入风险、暴露风险和发生后果。结果显示:ASF传入青岛市的风险较高,主要传入风险是大量生猪及其产品的调运;主要暴露风险是运输屠宰生猪及其产品的车辆、屠宰厂及肉制品加工企业冷库储备的猪肉及其产品;ASF传入后,会对青岛市的生猪养殖业、猪肉制品贸易和城市形象形成很大影响。因此,山东省青岛市应针对ASF传入和传播的高风险点,采取相应防控措施,严防ASF传入和传播,以保障青岛市养猪业的健康发展和猪肉食品供给。本研究为各地非洲猪瘟防控提供了技术参考。
    2020,37(2):24-28, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.02.006
    摘要:
    2019年6月27日,宁夏中卫市沙坡头区一生猪屠宰场报告发现1例ASF病例。疫情发生后,自治区、市、沙坡头区有关部门分别成立应急处置领导小组,对此疫情开展应急处置。划定屠宰场和关联养猪场周边3 km为疫区,对其实施封锁;疫区设置临时检查消毒站点,安排人员巡查和值守;关闭生猪屠宰场和仔猪市场,停止生猪流通和产地检疫出证。采取“拔点灭源”处置措施,扑杀疫点染疫、疑似染疫及易感动物,对病原可能污染的场所、物品等进行消毒或无害化处理;同时加强疫区内生猪养殖场户生物安全管理和疫情排查监测。生猪运输至掩埋场后对其进行电击扑杀并无害化处理。为加大疫情排查力度,着重对疫区、受威胁区开展疫情排查,同时排查临近区域及有生猪贸易地区的疫情风险。在各部门的相互配合下,此次疫情得到了有效控制,未发生疫情扩散。本次疫情处置提示,检测诊断要严谨、紧急流调要严密、疫情处置要严肃、疫情排查要严实。本次疫情的处置经验对全国其他非洲猪瘟的应急处置具有参考意义。
    2020,37(2):29-33, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.02.007
    摘要:
    为了解湖南省非洲猪瘟检测实验室能力水平,采用问卷调查、能力比对、现场调查等方式,对实验室类型、数量、仪器设备、人员配置、检测能力比对、运行情况、生物安全措施等开展全面调查。问卷及现场调查显示:湖南省具备非洲猪瘟检测能力实验室179个,其中系统内兽医实验室仅37个,检测力量薄弱,难以满足当前非洲猪瘟防控需要;屠宰企业实验室120个,但实验室条件简陋、人员配置不合理,检测结果难以有效保障;实验室仪器设备与检测试剂来源多样,缺少统一判定标准,结果准确率低;实验室质量管理体系及生物安全管理体系不完善,监管不规范。能力比对显示:参与完成能力比对的实验室150个,检测结果全部符合的实验室78个,实验室检测质量堪忧;屠宰企业实验室存在大量假阴性结果,疫病传播风险大。这提示湖南省虽拥有一批非洲猪瘟检测实验室,但整体检测水平不高,检测能力和实验室生物安全水平亟待加强。
    2020,37(2):34-37, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.02.008
    摘要:
    2019年黑龙江省动物疫病预防与控制中心对全省13个市(地)、67个县(市、区)的80个兽医实验室开展了检测能力比对,比对项目包括禽流感抗体检测、猪瘟抗体检测、布鲁氏菌抗体检测、非洲猪瘟病毒核酸检测。结果显示,6个市级实验室和14个县级实验室比对结果正确率为100%,禽流感抗体、猪瘟抗体、布鲁氏菌抗体、非洲猪瘟病毒核酸检测项目结果正确率分别为71.2%、97.3%、73.3%、97.0%。比对结果客观反映了全省兽医系统实验室检测能力,提示应进一步加强实验室建设,加大资金投入,提升技术人员业务能力,规范实验室检测流程。
    2020,37(2):38-41, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.02.009
    摘要:
    边境区域的动物疫病防控工作是决定能否阻断境外动物疫病传入的关键。本文对图们江区域的生猪养殖生物安全水平、防疫主体意识、生猪管理、流通调运和屠宰环节的情况及防控措施进行了分析,指出了养殖环节生物安全条件差、流通环节疫病传播风险高、屠宰环节消毒自检水平低以及人员力量不足等防控难点。这提示应着力提升养猪场户生物安全水平,严格监管生猪调运、强化运输车辆管控,加强屠宰环节监管,强化防疫队伍建设、健全防疫设施,以期为边境地区非洲猪瘟疫情防控提供借鉴。
    2020,37(2):42-45, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.02.010
    摘要:
    兽药影响动物源性食品质量安全,加大兽药监督执法力度是保障兽药质量,确保动物源性食品安全的重要内容。基于《兽药管理条例》修订滞后及兽药严重违法行为从重处罚情形等新规定出台等因素,致使执法人员在法律适用、违法事实认定和证据收集、货值及违法所得认定等方面存有争议。本文提出了应修订《兽药管理条例》及自由裁量基准,对无证经营兽药案中兽药进行定性,根据检验报告认定假劣兽药适用法律依据,正确认定兽药违法所得及文书制作等相关思考,旨在为规范兽药监督执法行为,提升执法队伍依法行政水平提供参考。
    2020,37(2):46-48, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.02.011
    摘要:
    2015年4月,郑州市畜牧兽医综合执法支队接×兽药生产企业举报,称有卖家假冒其公司名义在淘宝网出售非其公司生产的产品。经立案调查,认定违法当事人存在未取得兽药经营许可证擅自在网上销售兽药的事实,根据《兽药管理条例》规定,依法作出没收兽药产品及违法所得6万余元,并处40余万元的罚款决定。本文从电商平台内部管理有待规范、法律法规修订滞后、网络刷单等问题进行了分析,提出加强网络平台对入驻商家的资质审验把关,提高部门间监督协作能力,建立健全信息互通机制,完善相关法律法规及加强宣传引导等思考。
    2020,37(2):49-53, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.02.012
    摘要:
    非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)荧光PCR检测是防控非洲猪瘟(African swine fever,ASF)的关键环节。江苏省动物疫病预防控制中心对两家具备ASF检测资质的实验室,进行了阳性样品复核,发现检测结果存在假阳性。为避免实验室检测中出现检测失误,本文分析了导致ASFV检测假阳性结果的原因:实验室检测功能区域设置以及人员、物品流向不合理;检测人员操作不规范、不熟练,未在独立的生物安全柜中进行样品提取与试剂配制;实验室通风不良、清洁消毒不彻底,样品或提取模板间产生交叉污染,PCR试剂、产物、阳性质粒发生污染。为此,从实验室结构、环境、操作等方面提出控制建议:严格实验室功能分区与管理,规范各种试验操作与流程,加强实验室通风和消毒,控制试验中产生PCR污染的相关因素;同时省级实验室要加强对基层实验室的培训、指导和监督,使其在ASF防控中发挥应有的关键作用。本文为从事ASF等重大动物疫病PCR检测的实验室,在提高检测结果准确性和可靠性方面提供了参考。
    2020,37(2):54-58, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.02.013
    摘要:
    外来动物疫病防控是国家动物防疫工作的重要环节,对保障公共卫生、维护生态安全起着重要作用。当前,我国口岸动物疫病疫情复杂、风险隐患多、防控压力大。本文从我国动物疫病口岸防控现状、主要传入途径以及防控对策3个方面进行了综述。分析认为口岸动物疫病主要通过活动物和动物产品进口、走私、人员携带、邮寄、边境贸易以及媒介、生物迁徙等途径传入,因此需要通过加强风险分析和检疫准入、加强指定口岸建设和管理、强化口岸检疫防疫能力建设以及提高检疫处理的科学化和市场化水平等途径,防止动物疫病从口岸传入,保障国内畜禽养殖业发展和公共卫生安全。本文为口岸动物疫病防控措施和政策的制定提供了参考。
    2020,37(2):59-65, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.02.014
    摘要:
    为填补国内外水禽源痘病毒培养特性和理化特性研究方面的空白,对国内检测并鉴定的鹅源禽痘病毒,用鸡胚进行分离培养和病毒理化特性研究。将鹅皮肤痘疹样本研磨后,接种SPF鸡胚进行连续传代培养。病理检查和PCR检测证实,病毒可在鸡胚中增殖,且经连续5轮传代后,鸡胚病变及病毒滴度趋于稳定。鸡胚中可以观察到绒毛尿囊膜水肿增厚及白色痘斑等禽痘特征性病变。对采集病变的绒毛尿囊膜进行电子显微镜观察,可见病毒包涵体和典型禽痘病毒粒子。利用建立的鸡胚培养体系,对该病毒理化特性进行鉴定,发现病毒对热(55 ℃)、酸(pH3)、碱(pH11)、胰蛋白酶、乙醚和氯仿敏感。本研究首次建立了鹅源禽痘病毒鸡胚培养体系并对其理化特性进行了鉴定,从而为系统开展该病毒生物学特性和防控技术研究提供了必要的技术基础。
    2020,37(2):66-70, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.02.015
    摘要:
    为了解湖南省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的遗传变异情况,对湖南省2016—2019年分离的4株PRRSV(Hunan/2016/075、Hunan/2017/085、Hunan/2018/123、Hunan/2019/055)进行全基因组测序,对其ORF5、NSP2基因以及全基因组核苷酸序列进行分析。结果显示,分离的4株病毒株均为美洲型,全基因组同源性为83.1%~98.7%,其中3株属于高致病型,1株为属于类NADC30型。Hunan/2016/075、Hunan/2017/085毒株全长序列与谱系5中亚系5.1的代表性毒株BJ-4亲缘关系相近,聚为一簇;Hunan/2018/123毒株与谱系8.7中的tjnh1501毒株聚为一簇;Hunan/2019/055毒株独立成一簇,与谱系1亲缘关系相近。本研究掌握了湖南省PRRSV的遗传变异情况,从而为制定有效的防控策略提供了依据。
    2020,37(2):71-76, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.02.016
    摘要:
    湖南省某规模猪场的保育猪在转至育肥舍10 d后(约80日龄)陆续出现发病死亡情况。为确诊病情,查找病因,采集不同年龄段的猪血清进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、圆环病毒2型(PCV2)抗体检测,同时对4头发病猪进行剖检观察,并采集病料进行CSFV、PRRSV、PCV2病原检测以及细菌分离、药敏分析。结果显示:疫病发生前后的生猪CSFV抗体均不理想,无高抗体水平个体出现,但病原检测为阴性;生猪PRRSV、PCV2抗体整体上均经历了母源抗体下降、发病时抗体又上升的阶段,且病原检测均有阳性样本存在;在病料中分离到葡萄球菌、链球菌、副猪嗜血杆菌。由此推断,该次生猪发病原因可能为PRRSV、PCV2以及多种细菌的混合感染。结合病因推测,制定了防治方案,并有效控制了病情,也验证了此次发病的原因推断。本起疫情的诊断和防治为猪场多病原混合感染防控提供了参考,也提示规模猪场需要开展疫病的综合防控。
    2020,37(2):77-80, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.02.017
    摘要:
    为探究猪瘟病毒抗体纳米荧光检测试纸条的临床应用效果,对181份未免疫猪瘟疫苗、71份已免疫猪瘟疫苗的临床猪血清,采用本研究试纸条和北京世纪元亨公司的ELISA试剂盒分别进行抗体检测,对4头存在母源抗体的不同免疫时间仔猪血清、不同阶段的猪血清,采用本研究试纸条进行抗体检测,并对检测结果进行分析统计。结果显示,本研究试纸条与北京世纪元亨公司的ELISA试剂盒的阴性符合率为100%,阳性符合率为95.77%,经Kappa检验两者一致性良好;初生仔猪首免后,猪瘟抗体滴度有所下降,30 d后加强免疫,抗体滴度逐渐升高,试纸条检测结果与猪瘟抗体衰减变化过程呈正相关;不同阶段猪群的猪瘟抗体阳性率均为100%,抗体平均值较高,离散度较整齐,与规模化养猪场合理免疫程序相吻合。综合表明,本试纸条的临床应用效果较好,可用于实时监控猪群的猪瘟抗体变化,适用于基层规模化猪场的猪瘟抗体快速检测。
    2020,37(2):81-86, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.02.018
    摘要:
    为建立一种快速准确检测鸡传染性支气管炎病毒的方法,根据鸡传染性支气管炎病毒的核衣壳蛋白基因进行引物和探针设计,建立了一种能够检测鸡传染性支气管炎病毒的实时荧光RT-PCR方法,并对该方法进行特异性和灵敏度检测,同时与国家标准检测方法进行对比。结果显示,本检测方法特异性好,不与其他相关病毒发生交叉反应,灵敏度可达到10-4 ng/μL,与国标检测方法的符合率达100%。结果表明,本研究建立的检测方法可以准确鉴定鸡传染性支气管炎病毒,具有良好的应用前景。
    2020,37(2):87-93, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.02.019
    摘要:
    为建立冷冻原肠中细菌基因组DNA的直接提取法,采用震荡洗脱、金属网过滤和梯度离心相结合的方法,对2份冷冻原肠样品进行前处理;对经前处理后的原肠样品,采用酚/氯仿法提取细菌基因组DNA,然后进行琼脂糖电泳和OD260/OD280比值测定;以细菌基因组DNA为模板,用PCR技术扩增细菌16S rDNA并构建克隆文库,并从2个文库中各随机挑取3个菌落进行16S rDNA 的PCR鉴定和DNA测序。结果显示:样品提取的DNA浓度、纯度较高,OD260/OD280比值介于1.8~2.0;挑取的6个菌落中,1个为阴性,剩余5个为阳性,为肠球菌属(Enterococcus)和魏斯氏菌属(Weissella)的5种细菌。结果表明,本研究提取的原肠细菌基因组DNA质量较好,可用于非培养法研究冷冻原肠中细菌的多样性。本研究解决了因缺乏原肠细菌基因组DNA提取方法,无法进一步应用现代分子生物学方法研究冷冻原肠细菌的多样性、菌群组成结构和动态变化等难题。
    2020,37(2):94-98, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.02.020
    摘要:
    为确定生鲜乳中单核细胞增生李斯特菌的快速检测方法,以从河南省奶站及奶牛养殖场抽取的267批生鲜乳为检测对象,分别采用传统培养法、PCR检测法和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法进行检测,并以传统培养法为参考标准,对检测结果进行比对确认。结果显示:常规的传统培养法检出阳性3份;PCR法检出阳性5份,经传统培养法确认阳性3份,符合率为60%;基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法检出阳性3份,经传统培养法全部确认为阳性,符合率为100%。结果表明,同传统培养法相比,PCR法容易产生假阳性结果,而基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法能够快速、准确检测生鲜乳中单核细胞增生李斯特菌,适合于大批量样品的快速检测。
    2020,37(2):99-106, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.02.021
    摘要:
    重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA )是近几年新发展并普及应用的一种核酸扩增技术,能够实现检测设备小型化,从而满足现场诊断(point-of-care testing,POCT)的需求。本研究以鲤春病毒血症病毒(spring?viraemia?of?carp virus,SVCV)?为检测靶标,建立了SVCV的RPA检测技术,并分析了该方法的灵敏性、特异性和稳定性,评判了该技术应用于POCT的可能性。结果表明:基于RPA的检测方法灵敏度较高,检测下限可达4×103 PFU/mL,但比以Taq酶为基础的RT-PCR技术略低;特异性好,未发现对其他水生动物疫病病原,如传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)、病毒性出血性败血症病毒(VHSV)、传染性胰腺坏死病病毒(IPNV)、传染性鲑鱼贫血病病毒(ISAV)等发生非特异性反应;稳定性良好,3次重复性试验的结果近乎一致。试验证明,该方法能够替代RT-PCR技术,应用于POCT的试剂和仪器设备研发。
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    2017,34(11):89-93, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.024
    [摘要] (497) [HTML] (0) [PDF 754.31 K] (2239)
    摘要:
    为建立一种快速检测犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒Ⅱ型(CAV-2)和犬副流感病毒(CPIV)的多重PCR方法,参照GenBank中的相关病毒基因序列,分别设计了4对引物,用于特异性扩增CDV H基因、CPV VP2基因、CAV-2 E3基因和CPIV NP基因上的目的片段。通过优化反应条件,建立了同时扩增CDV(410 bp)、CPV(253 bp)、CVA-2(655 bp)和CPIV(868 bp)的多重PCR方法。利用建立的多重PCR方法,对CDV、CPV、CAV-2、CPIV、CDV+CPV+CAV-2+CPIV和犬冠状病毒(CCV)的DNA或cDNA模板进行扩增,发现该方法的特异性良好。利用建立的多重PCR方法与单一PCR方法进行敏感性比较,发现两者敏感性相差10倍,证明多重PCR方法敏感性良好。利用该方法对从北京市采集的30份犬病料样品进行检测,发现CDV阳性率为63.33%(19/30)、CPV阳性率为33.33%(10/30)、CAV-2阳性率为6.66%(2/30)、CPIV阳性率为0(0/30)。检测结果证明建立的多重PCR方法可用于临床诊断。
    2017,34(11):94-98, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.025
    [摘要] (462) [HTML] (0) [PDF 720.54 K] (2150)
    摘要:
    为表达山羊痘病毒P32蛋白并研究其免疫原性,构建了含有P32基因的重组表达质粒pET-P32,诱导表达和纯化了P32蛋白;分别运用SDS-PAGE和Western blot,对该蛋白进行了分析和生物活性鉴定;用分析鉴定后的P32蛋白免疫BALB/c小鼠,然后采集小鼠血清,用间接ELISA进行抗体检测;用小鼠脾淋巴细胞增殖试验,检测该蛋白对机体的细胞免疫活性。结果显示:表达纯化的含有GST标签的P32重组蛋白,大小约39 kDa;Western blot显示 P32重组蛋白具有较好的特异性;间接ELISA抗体检测和小鼠脾淋巴细胞增殖试验表明P32重组蛋白具有良好的免疫原性。本试验结果为深入研究P32蛋白的生物学功能以及对山羊痘的诊断与防治奠定了基础。
    2017,34(11):65-69, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.018
    [摘要] (437) [HTML] (0) [PDF 490.80 K] (2055)
    摘要:
    鹿科动物慢性消耗性疾病是鹿科动物发生的一种致死性神经退行性疾病,属于传染性海绵状脑病的一种。本文从病原学、地理分布、宿主范围、传播方式、环境的重要作用以及人类安全、诊断、防控等方面,对最新研究进展进行了综述,以期对该病的防控提供参考。
    2017,34(11):25-28, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.007
    [摘要] (520) [HTML] (0) [PDF 417.94 K] (1796)
    摘要:
    出境生物物种资源查验是保障国门生物安全,遏制资源流失,促进生态文明建设的重要环节。本文阐述了我国生物物种资源流失及监管现状,分析了出境生物物种资源查验面临的法规不健全、生物物种鉴定能力受限、管控名录缺乏、监管体系缺位等问题,并剖析了问题产生的原因。在此基础之上,提出了对出境生物物种资源查验的对策建议,包括加强法制建设、制定管制物种名录、健全物种资源查验机构、加强研发与人才培养、加强公众宣传等。
    2017,34(11):99-103, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.026
    [摘要] (485) [HTML] (0) [PDF 988.47 K] (1705)
    摘要:
    金鱼造血器官坏死病毒(Goldfish haematopoietic necrosis virus,GFHNV)是一种可感染金鱼等鲤科鱼类,并可导致其死亡的疱疹病毒。为了快速检测病原,本研究根据GFHNV的主要衣壳蛋白(Major captor protein,MCP)序列中的一段保守基因序列,设计引物和TaqMan探针,建立了GFHNV特异性的实时荧光定量PCR检测方法;并利用PCR反应扩增出的MCP基因,制备了pUC-GFHNV重组质粒作为阳性对照。经试验,该方法检测限最低可达10个拷贝数的目的基因,而且与锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV)、甲鱼虹彩病毒(Softshell turtle iridovirus,STIV)、流行性造血器官坏死病毒(Epizootic haematopoietic necrosis,EHNV)、斑点叉尾鮰病毒(Channel catfish virus,CCV)以及白斑综合症病毒(White spot syndrome virus,WSSV)等5种水生动物病毒无交叉反应。该方法具有简便、快速、敏感、特异等优点,为该病的诊断与病原检测提供了一个重要手段。
    2017,34(11):29-31, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.008
    [摘要] (512) [HTML] (0) [PDF 390.92 K] (1702)
    摘要:
    本文分析了进境种牛在境外出口隔离场免疫牛病毒性腹泻灭活疫苗后,对该病后续检疫工作的影响:从血清样品中进行病毒分离会受到干扰;对出口隔离场检疫所用的抗原捕捉ELISA几乎没有影响;对种牛在国内进口隔离场检疫及后续检疫时,如使用针对结构蛋白Erns的抗原捕捉ELISA试剂盒,则影响较小,如使用针对非结构蛋白的NS2-3 抗原捕捉ELISA试剂盒,则影响很大;免疫导致无法区分自然感染和免疫反应。进而提出了取消免疫该疫苗的建议,并得到了进出口国政府主管部门的认同并付诸实施。
    2017,34(11):4-7, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.002
    [摘要] (481) [HTML] (0) [PDF 602.71 K] (1540)
    摘要:
    采用RT-PCR及PCR技术,对广西梧州市7个县(市、区)屠宰场2015—2016年送检的1 304份猪组织样品(肺脏、淋巴结、脾脏)进行高致病性蓝耳病病毒(HPRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)核酸检测,对7个规模场送检的70份病死猪组织病料样品(肺脏、淋巴结、脾脏)进行HPRRSV、CSFV、伪狂犬病病毒(PRV)、圆环病毒(PCV)核酸检测。采用ELISA技术,对梧州市7个县(市、区)送检的8 572份血清检测猪瘟免疫抗体,对2 066份血清检测猪蓝耳病免疫抗体。结果显示:HPRRSV、CSFV核酸检测均为阴性;规模场病死猪组织病料的PRV核酸阳性率为14.3%,PCV为57.1%;猪瘟免疫抗体合格率为90.41%,蓝耳病免疫抗体合格率为73.48%。监测结果表明:梧州市流行的生猪高热病主要涉及猪伪狂犬病和猪圆环病毒病2种病毒病;猪蓝耳病和猪瘟的强制免疫,有效控制了该地主要猪病毒性疫病的发生与流行。
    2017,34(3):34-38, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.03.009
    [摘要] (474) [HTML] (0) [PDF 728.79 K] (1440)
    摘要:
    本文介绍了我国动物源细菌耐药性监测网络的组成和主要内容,详细阐述了其过程控制,包括采样、细菌分离鉴定和耐药性检测、耐药性检测结果汇总分析等,并介绍了我国取得的成就,如建立了动物源细菌耐药性监测技术平台和耐药性细菌资源库、创建了具有自主知识产权的动物源细菌耐药性数据库、摸清了我国动物源细菌的耐药性状况等。针对我国动物源细菌的耐药现状,提出了应对措施,包括规范我国兽用抗菌药物饲料添加剂的使用、加强动物处方药的管理并建立治疗用抗菌药物的分级管理制度、持续开展畜禽细菌耐药性动态监测等。
    2017,34(11):38-41, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.011
    [摘要] (503) [HTML] (0) [PDF 643.18 K] (1393)
    摘要:
    本文全面分析了我国兽医实验室能力验证计划10余年来的发展轨迹,从多方面、多维度总结分析我国动物检疫领域能力验证计划的实施情况,梳理了我国兽医领域能力验证现状、特点及所存问题,指出了我国兽医领域能力验证缺乏规范化管理的现状。基于目的性、系统性、科学性、兼容性和实用性的构建原则,创造性的提出了兽医实验室能力验证分类方法及兽医实验室能力验证体系表建立的初步设想。
    2017,34(11):46-48, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.013
    [摘要] (554) [HTML] (0) [PDF 415.31 K] (1319)
    摘要:
    本文概述了吉林省无疫区建设的基本情况,阐述了吉林省动物卫生监督所在建设免疫无口蹄疫区过程中采取的主要工作措施与取得的成效,并从政府重视、任务分工、宣传培训、督导检查等方面总结了工作体会,以期为无疫区建设省份提供借鉴。
    2017,34(11):70-73, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.019
    [摘要] (597) [HTML] (0) [PDF 522.55 K] (1296)
    摘要:
    猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type 3,PCV3)为新发传染病病原。2016年美国首次报道了该病的发生与流行。为了解PCV3在我国猪群中的分布与流行状况,本研究建立了PCV3 PCR检测方法。敏感性和特异性试验结果表明,该方法对PCV3的最低核酸检出量为38 pg,可扩增出284 bp的特异性片段。利用建立的PCR方法对从河北省猪场收集的168份疑似样品进行检验,检出阳性样本9份,表明河北猪群存在PCV3感染。
    2017,34(11):86-88, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.023
    [摘要] (491) [HTML] (0) [PDF 440.37 K] (1282)
    摘要:
    为确定口蹄疫O-A-Asia1型三价灭活疫苗免疫骆驼的安全性和免疫效果,分别进行了2倍注射剂量和3倍注射剂量的安全性试验和最小免疫剂量试验。结果显示:该疫苗对6月龄以上骆驼安全,无任何毒副反应;适宜的免疫剂量为6月龄以上骆驼每峰3.0 mL。该类型疫苗对骆驼安全,免疫效果良好;一次接种可同时预防O、A、Asia1 3个血清型的口蹄疫。
    2017,34(11):60-64, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.017
    [摘要] (458) [HTML] (0) [PDF 522.36 K] (1281)
    摘要:
    猪乙型脑炎严重危害着人类健康,给世界养猪业造成了极大经济损失。本文从血清学和病原学方面入手,综述了猪乙型脑炎病毒最新实验室检测方法研究进展,以期为该病的预防与控制提供参考。
    [摘要] (1536) [HTML] (0) [PDF 2.95 M] (1235)
    摘要:
    为了解河南省郑州市2018年规模猪场的伪狂犬病野毒感染情况,利用gE抗体ELSIA方法,对免疫过猪伪狂犬病gE基因缺失疫苗的36个不同养殖规模的定点监测猪场,进行gE抗体检测。2018年1—12月,共检测血清样品1 057份,检出阳性场27个,场群阳性率为75.0%(27/36);检出阳性样品309份,样品阳性率为29.2%(309/ 1 057)。结果表明,郑州市伪狂犬病野毒感染面较广,流行率较高,存在较高的疫情暴发风险。存栏500头以下规模猪场的gE抗体阳性率(69.8%)是存栏3 000头以上的规模场(19.1%)的3.65倍,表明养殖规模越小,伪狂犬病野毒感染风险越大。利用荧光PCR方法对gE抗体阳性样品进行检测,检出阳性32份,阳性检出率为35.6%(32/90),表明感染猪群的持续带毒、排毒现象较为严重。建议规模化养猪场加强gE基因缺失疫苗免疫和gE抗体检测,及时淘汰阳性猪,同时结合隔离、消毒等综合防控技术,逐步实现猪伪狂犬病的控制与净化。
    2017,34(11):79-81, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.021
    [摘要] (517) [HTML] (0) [PDF 509.21 K] (1177)
    摘要:
    为比较3种品牌(A、B、C)伪狂犬病病毒(PRV)gE抗体ELISA检测试剂盒的临床使用效果,应用中和试验来标定伪狂犬病非免疫猪场的180份临床血清样品,同时用3种试剂盒进行检测,并对试剂盒的重复性、敏感性、特异性以及与中和试验结果的符合度等指标进行测定与分析。结果显示:3种试剂盒的批内稳定性均较好,变异系数均小于10%;批间重复性差异较大,变异系数最小者为8.09%,最大者高达21.31%;3种试剂盒的诊断特性良好,敏感性为95.56%~97.78%,特异性为94.44%~100%;各试剂盒检测结果与中和试验结果均完全相符(Kappa值为0.91~0.96)。比较结果表明,3种试剂盒均适用于临床样品的PRV gE抗体检测,其中稳定性及敏感性俱佳的试剂盒C更适用于PRV的持续监测、早期发现、引种检疫及净化效果评估,而特异性与准确性最高的试剂盒B更适用于贵重病畜的诊断淘汰。因此,生产实践中应根据诊断目的合理选择最适试剂盒。
    [摘要] (462) [HTML] (0) [PDF 503.28 K] (1149)
    摘要:
    2010—2012年在全国新城疫主动监测中分离并鉴定出6株基因XII型新城疫病毒。这是我国首次发现该基因型病毒。分离到的XII型新城疫病毒全部分布在我国南方地区,多为水禽分离株,仅有1株为鸡源分离株。脑内接种致病指数(ICPI)和分离株F蛋白裂解位点的氨基酸组成证实分离株均为新城疫强毒。进一步的遗传进化分析表明,这6株分离株属于基因XIIb亚型,与南美地区的XII型分离株基因型不同(XIIa亚型)。对于国内新出现的基因XIIb新城疫病毒的来源,仍需要更多的监测数据来证实。目前的监测数据表明,这种在我国新出现的XII型新城疫病毒具有在当地造成地方流行和进一步扩散的风险。
    2018,35(8):17-22, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2018.08.005
    [摘要] (179) [HTML] (0) [PDF 882.84 K] (1121)
    摘要:
    为了解浙江省南美白对虾主产区苗种主要病原的携带情况,对杭州、宁波、嘉兴和绍兴4个地区的苗种场开展了病原检测。129批次样品的检测结果显示:有4种病原检出阳性,阳性检出率分别为南美白对虾白斑综合症病毒(WSSV)1.55%、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)20.93%、虾肝肠胞虫(EHP)31.78%、虾血细胞虹彩病毒(SHIV)37.21%,而桃拉综合症病毒(TSV)未有阳性检出。结果表明,SHIV、EHP、IHHNV是浙江省对虾苗种携带的主要病原,需要重点加以防范。从整体分布看,宁波市南美白对虾苗中携带的病原种类最多,且携带率较高,提示宁波市需要加强防控。从苗种来源看,来自福建省虾苗的IHHNV携带率最高,为38.10%;来自海南省和广东省虾苗中存在WSSV感染,检出率分别为2.17%和2.27%;来自广东省虾苗的EHP和SHIV携带率最高,分别为43.48%和41.30%。由于浙江省南美白对虾苗种主要依靠外地输入,而这些输出地区的苗种病原感染率较高,因此浙江省需要加强从这些地区引入苗种的检疫工作。
    2017,34(2):101-105, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.02.029
    [摘要] (460) [HTML] (0) [PDF 1.25 M] (1119)
    摘要:
    核酸适配体(Aptamer)是一类单链短DNA或RNA片段,具有一定的空间结构,对特定靶分子具有亲和力。本研究采用指数富集配体系统进化技术(SELEX),首次筛选出针对鲤春病毒血症病毒(SVCV)的核酸适配体A2和A15,经过荧光PCR、凝胶阻滞和病毒中和实验,证明了其对SVCV具有结合力和抑制作用,在该病的检测和防治方面具有良好的前景。
    2012,29(9):78-78, DOI:
    [摘要] (481) [HTML] (0) [PDF 631.96 K] (1021)
    摘要:
    2017,34(8):87-91, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.08.023
    [摘要] (665) [HTML] (0) [PDF 797.21 K] (1018)
    摘要:
    非洲猪瘟是一种跨境动物疫病,对世界养猪业危害严重。目前,该病的流行范围越来越广。为防止该病传入我国,当前急需建立快速、简便、可靠的检测方法。本研究通过分析非洲猪瘟病毒B646L基因保守区域,设计并合成了特异性引物和exo探针,建立了检测非洲猪瘟病毒的实时荧光RPA方法。利用该方法可在20 min内完成检测过程,最低可检测到16拷贝/反应;与猪的其他常见病原核酸无交叉反应;与荧光PCR方法具有相似的灵敏度和特异性;利用该方法对100份国内临床样品进行检测,结果均为阴性。本研究所建立的非洲猪瘟病毒实时荧光RPA检测方法具有简单、快速、敏感性高、特异性强的优点,在临床鉴别诊断、检验检疫和病原监测等方面具有广泛的应用价值。
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