《中国动物检疫》由中华人民共和国农业农村部主管、中国动物卫生与流行病学中心主办,是我国兽医管理领域唯一的国家级指导性科技期刊。本刊曾于1992年、2004年被列入“中文核心期刊”,2014年被列入“中国农业核心期刊”,2020年被评为“中国农林核心期刊(A类)”。本刊以竭诚服务兽医行业为宗旨,以宣传行业政策法规、推进理论创新、推动科技进步、提升行业队伍工作水平为目标。栏目主要设有:流行病学、动物检疫、公共卫生、监督执法、兽医管理、技术支撑、专论综述等。本刊已被“中国学术期刊网络出版总库”(知网)、《中国核心期刊》(遴选)数据库(万方)、《中文科技期刊数据库》(维普)、“超星期刊域出版平台”(超星)收录。

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    2021,38(10), DOI:
    摘要:
    2021,38(10):1-8, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.001
    摘要:
    为掌握广西地区导致猪群腹泻的主要病毒性病原的流行态势,为养殖场猪病毒性腹泻的综合防控提供依据,用实时荧光RT-PCR检测方法,对2017年1月—2021年6月广西14个地市489个猪场1 206份临床腹泻样品进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(PoRV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪丁型冠状病毒(PDCoV)等病原检测,并分析其阳性检出率在不同年份、季节、地区、年龄段猪群之间的差异以及病原混合感染情况。结果显示,2017—2021年,PEDV、PDCoV、PoRV、TGEV样品阳性检出率分别为49.67%、7.63%、4.56%和0.33%,场阳性检出率分别为53.37%、8.18%、8.18%和0.61%;病毒性腹泻病原有一定的季节性流行特征,多表现为冬、春季流行加重;PEDV、PDCoV普遍流行,PoRV局部流行,TGEV散发流行;4种病原对不同年龄段腹泻猪群的感染率存在差异,其中对哺乳仔猪危害最为严重;猪群以单一感染为主,主要为PEDV单一感染,阳性检出率为47.93%,混合感染均为二重感染且感染率较低。结果表明,导致广西地区猪群腹泻的主要病毒性病原主要为PEDV、PDCoV和PoRV,其中PEDV为最主要病原,其他病原也呈流行加重趋势,需进一步加强病原监测和疫病综合防控。
    2021,38(10):9-11, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.002
    摘要:
    为了解J亚群禽白血病病毒(ALV-J)在山东省枣庄市鸡场的流行情况,2019—2020年在枣庄市39家鸡场采集1 174份血清样品,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行ALV-J抗体检测。结果显示:39家鸡场中有27家检出阳性,群体阳性率为69.2%(95%CI:56.2%~85.1%);1 174份鸡血清样品中,有200份为阳性,个体阳性率为17.0%(95%CI:15.2%~19.6%)。不同区域间个体阳性率,经卡方检验差异显著(χ2=27.48、P<0.01);群体阳性率,经fishers确切检验,差异不显著(P>0.05)。2019年个体阳性率为12.4%(95%CI:10.0%~15.3%)、2020年为21.8%(95%CI:18.9%~25.7%),经卡方检验差异显著(χ2=18.51、P<0.01);2019年群体阳性率为65.0%(95%CI:45.4%~87.3%),2020年为73.7%(95%CI:55.5%~94.9%),经fishers确切检验,群体阳性率差异不显著(P>0.05)。结果表明,枣庄市鸡场普遍存在ALV-J感染,感染率较高。建议继续深入推进禽白血病净化工作,加强引种管理,严把疫苗免疫关,做好综合防控。
    2021,38(10):12-15, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.003
    摘要:
    为做好河南省小反刍兽疫防控工作,全面掌握小反刍兽疫免疫抗体水平及病毒感染状况,按照2020年河南省动物疫病专项监测方案要求,在全省开展了小反刍兽疫专项监测。在群内采用随机采样原则,对全省所有种羊场以及较大规模羊场(存栏量≥3 000只)进行调查,共监测60个养殖场,采集血清学样品1 817份,病原学样品1 718份,使用竞争ELISA、荧光RT-PCR分别检测小反刍兽疫免疫抗体水平及病毒核酸。结果显示:小反刍兽疫平均免疫抗体合格率为73.80%,其中商品场免疫抗体水平优于种羊场;不同企业生产的小反刍兽活疫苗免疫抗体合格率均高于70%的农业农村部最低标准;不同区域羊场免疫抗体水平有所差异,免疫2次及以上的羊场免疫抗体水平优于只免疫1次的;所有样品小反刍兽疫病毒核酸检测均为阴性。结果表明,河南省近期发生小反刍兽疫疫情的风险较低,防控成效较好。
    2021,38(10):16-21, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.004
    摘要:
    为了解近年来京津冀地区猫传染性腹膜炎(FIP)的发生发展及流行规律,丰富和更新FIP流行病学数据,2018—2020年从京津冀地区73家动物医院搜集725例疑似猫冠状病毒(FCoV)感染病例的临床检查信息,同时将病例对应的积液、粪便等样本进行分子生物学检测,结合临床信息和检测结果,对FIP流行情况进行三间分布描述和统计学分析。结果显示:京津冀地区疑似病例的FCoV阳性检出率较高,为75.0%(544/725),其中传染性腹膜炎型308例,占42.5%。308例FIP确诊病例中,298例(96.7%)出现了长期反复发烧、腹腔或胸腔积液等湿性临床症状;春、夏、秋、冬四季的FIP阳性检出率分别为37.4%、40.1%、52.8%和37.3%,差异有统计学意义(χ2=18.051,P<0.01);各品种猫均可发病,其中英国短毛猫(36.0%)、中华田园猫(15.9%)和美国短毛猫(26.0%)FIP阳性检出率较高;雌猫的FIP阳性检出率为36.8%,雄猫为45.3%,二者差异有统计学意义(χ2=4.840,P<0.05);未绝育猫(251例)高于绝育猫(57例),差异显著(P<0.05);各个年龄段猫均可感染FCoV甚至发展为FIP,阳性检出率差异具有统计学意义(P<0.05),其中以2月龄到1岁的阳性检出率最高(54.8%)。结果表明:京津冀地区FCoV感染及FIP发生较普遍;FIP发生与年龄、性别、品种、绝育情况和季节相关性较高,多发于幼龄、青壮年以及纯种、未绝育的雄性猫,夏秋高温季多发,主要表现湿性临床症状。结果提示,应重视FIP预防,针对其流行特点制定相应措施,尽早诊断,尽早介入治疗。
    2021,38(10):22-26, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.005
    摘要:
    猪流行性腹泻是猪场新生仔猪腹泻的主要病原之一。为确定云南省曲靖市某猪场新生仔猪出现呕吐、腹泻和高死亡率的病因,采集病死仔猪肠道、肠系膜淋巴结、脾脏等组织病料,处理后提取病原核酸,通过RT-PCR进行导致仔猪腹泻的猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪伪狂犬病病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等病原核酸检测。结果显示,仅PEDV核酸阳性,其他病原均为阴性。对检出的PEDV阳性样品N基因进行序列分析发现:阳性样品N基因与河北的T10-HB2018毒株核苷酸同源性最高,为99.7%;与疫苗株AJ1102和LW/L毒株核苷酸同源性为97.4%~97.5%,在同一个分支上,均属于基因II群;与经典毒株CV777株核苷酸同源性略低,为95.7%。结果表明,引起该仔猪群腹泻的主要病因为PEDV感染,流行毒株未发生变异,当前疫苗对其防控有效。依据分析结果,该场采取PEDV疫苗紧急免疫,使疫情得到有效控制。本研究对于指导该地区猪群腹泻病防控具有参考意义。
    2021,38(10):27-29, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.006
    摘要:
    为了解云南省鸡传染性贫血病毒(chicken anemia virus,CAV)的流行及其VP2基因变异情况,2017—2020年,在昆明市、楚雄州、大理州、红河州、玉溪市等家禽养殖密集区的89个鸡场,采集422份疑似病鸡肝脏样品,通过PCR方法检测CAV核酸。结果显示,检出阳性245份,平均阳性率为58.06%;不同年份的CAV核酸阳性率为53.61%~60.91%,不同区域核酸阳性率为51.68%~63.52%。对3份CAV阳性样品进行VP2基因序列分析,发现核苷酸序列同源性为99.6%~99.8%,与参考毒株1852TW和N7的核苷酸同源性为99.6%~99.8%,均属于GroupA分支。结果表明:云南省普遍存在CAV感染,且感染较严重;VP2基因仍可作为PCR病毒核酸检测的首选目标基因。通过加强鸡群CAV监测,淘汰阳性鸡群和结合疫苗免疫,可减少该病造成的损失。
    2021,38(10):30-36, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.007
    摘要:
    肉鸡屠宰是生鲜肉流入市场的最后一道环节,但在屠宰加工过程中很容易造成交叉污染。为寻找屠宰链的关键污染环节并根据其特点采取有效的防控措施,总结了屠宰环节主要的食源性病原菌污染途径及屠宰场常用消毒剂。研究显示:屠宰场肉鸡污染源主要来自肉鸡本身携带的病原菌及屠宰过程中的交叉污染,污染途径主要包括屠宰环境及设施、屠宰用具以及预冷和分割。目前成本最低且最易实现的控制手段是消毒,可从物理消毒及化学消毒着手,按照每种方式的优缺点合理选用,加强对屠宰设备及各屠宰环节的消毒,减少二次污染,同时开发符合食品标准的高效消毒剂,保障上市生鲜肉的食品卫生安全。
    2021,38(10):37-44, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.008
    摘要:
    下一代测序技术是一次性可对几十万到几亿的DNA分子进行序列测定的高通量技术,正广泛应用于生命科学各个领域。为了解下一代测序技术的发展现状及应用情况,本文综述了下一代测序技术的基本情况,与传统微生物检测方法相比的优势,以及在食源性致病微生物风险识别和溯源方面的应用,以期为食源性致病微生物风险监测和食源性疾病防控等提供参考。
    2021,38(10):45-50, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.009
    摘要:
    为了解进口饲料中沙门氏菌的耐药情况,分离、鉴定进口饲料中的沙门氏菌,采用药敏试剂盒对分离的沙门氏菌菌株进行了14种抗菌药物的敏感性试验。结果显示,从进口饲料中分离鉴定出的148株沙门氏菌对14种抗菌药物的敏感率均在93%(138/148)以上,对阿奇霉素完全敏感;148株沙门氏菌中有8株具有耐药性,以多重耐药为主,分离自7个国家和地区的样品。结果说明,进口饲料中沙门氏菌耐药率相对较低,但部分国家样品中的沙门氏菌存在耐药,而且多为多重耐药。建议加强进口饲料中的沙门氏菌及其耐药性监测,防止国外沙门氏菌,特别是耐药沙门氏菌的传入。
    2021,38(10):51-54, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.010
    摘要:
    在世界兽医器械产业格局中,日本占据着非常重要的地位,市场份额超过15%,技术水平处于世界顶端。日本的兽医器械产业法律完善,权责分明,产品质量和安全性管理流程清晰。我国畜牧业和宠物医疗市场的发展对兽医器械的数量和质量都提出了更高要求。因此,调查研究日本的兽医器械监管情况,对我国的行业监管具有重要借鉴价值。本文介绍了日本兽医器械监管体系及监管经验,以期为我国实现兽医器械的规范化管理提供参考。
    2021,38(10):55-61, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.011
    摘要:
    为了解山东省规模猪场非洲猪瘟防控成本和效益变化情况,2020年上半年从母猪繁殖性能、育肥猪生产性能、仔猪及饲料购买费用、医疗技术投入费用、防控成本以及收入和利润等方面,对抽检的19家规模养猪场开展问卷调查,并对调查结果分别与2019年和非洲猪瘟疫情发生前年份(以下简称正常年份)进行统计对比。结果显示:2020年上半年规模猪场能繁母猪存栏量同比增加200.1%,比正常年份增加372.8%;育肥猪年出栏量同比增长720.7%,比正常年份增长527.0%。仔猪平均购买价格同比增长49.2%,比正常年份增长167.8%;医疗防疫费同比增长4.1%,比正常年份增长11.6%;改造或新建防控设备设施投入大幅增加,其中智能化系统、散装饲料塔、空气过滤系统、外墙防护设施的升级新建投入费用均超过1 600万元;血清学检测费用同比增加3.4%;病原学检测费用同比增加103.4%。断奶仔猪平均售价同比增长59.9%,比正常年份增长148.4%;育肥猪平均售价同比增长24.4%,比正常年份增长127.0%;净利润同比增加63.2%,比正常年份增加1 125.8%。结果表明,山东省规模猪场在防控非洲猪瘟疫情方面的投入明显加大,但生猪产能显著提升,生猪养殖收益大幅增加,因而生猪生产恢复趋势利好。
    2021,38(10):62-64, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.012
    摘要:
    为健全哈密市伊州区畜牧兽医社会化服务体系,促进全区畜牧业持续、健康、高效、稳定发展,通过对伊州区基层畜牧兽医体系存在的公共服务机构服务能力不足、社会服务机构缺失等主要问题进行剖析,有针对性地提出了提高公共服务机构的服务能力,完善社会化服务体系,创新社会化服务思维等建议,旨在为其他存在相似问题的地区加强基层兽医社会化服务体系建设提供参考。
    2021,38(10):65-68, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.013
    摘要:
    村级防疫员是现阶段基层动物防疫队伍的重要力量,在强制免疫以及高致病性禽流感、非洲猪瘟等重大动物疫病防控中发挥着重要作用。安徽省在全国率先创建村级防疫员队伍,为全国动物防疫工作贡献了安徽方案、安徽智慧。新修订的《中华人民共和国动物防疫法》对村级防疫员队伍建设和职能定位作出了新的规定。本文总结了安徽省在村级防疫员队伍建设方面采取的主要做法、主要成效,分析了队伍建设中存在的主要问题,提出进一步健全规章制度、加大投入力度、规范队伍管理等措施建议,并从“转身份、转职能、转服务、转方式”等视角对队伍未来建设进行了构想。
    2021,38(10):69-73, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.014
    摘要:
    2021年1月,江苏省连云港市云台山景区云台街道西隅水库发生一起疑似野禽H5N8亚型禽流感疫情,共17只鸳鸯、大雁感染死亡。江苏省动物疫病预防控制中心迅速组织相关人员,指导连云港市按照国家相关方案和规范要求,开展现场调查、实验室诊断和应急处置工作。经江苏省动物疫病预防控制中心初诊,国家禽流感参考实验室确诊,诊断为H5N8亚型高致病性禽流感疫情。同时,指导当地政府划定疫点、疫区和受威胁区,封锁相关区域,开展应急监测、紧急流行病学调查、全面消毒等应急处置工作。经果断处置,疫情得到了有效控制,未造成扩散和蔓延。本次疫情提示:野禽疫情的早期发现和及时控制对于降低疫情扩散风险至关重要;林业和农业农村部门的沟通协作要继续加强,日常的禽流感监测力度需要进一步加大,家禽的禽流感疫苗免疫要更加科学,群众的禽流感防控意识要持续提高。
    2021,38(10):74-77, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.015
    摘要:
    动物疫病强制免疫指向了动物源性食品所蕴含的深刻法益,包括本体意义上的生物安全、客体意义上的食品安全和整体意义上的公共卫生安全。经过多年的制度探索与试点实践,新《动物防疫法》构建了“养殖场(户)主体责任+主管部门监管责任+地方政府属地管理责任”的体系,深化了生物安全公私协作的治理模式,塑造了引导养殖主体践行科学安全养殖观的激励路径,丰富了生物安全共同体的新发展意蕴。
    2021,38(10):78-82, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.016
    摘要:
    肥胖会引起机体代谢不正常进而引发一系列代谢综合疾病。目前肥胖的潜在分子机理和生物分子机制研究进展比较缓慢,其中的一个重要瓶颈就是动物模型的选择。为探索模型猪应用于人类肥胖研究的可行性,从基因组进化和生理学上分析了模型猪应用于人类肥胖研究的优势,提出了啮齿类动物模型的局限性,概述了模型猪用于人类肥胖研究的进展。猪的基因组与人类的相似度约为60%,代谢系统模式与人类也十分相似,且在消化生理机能、饮食习惯、器官大小和脂肪组织分布上具有高度的相似性,相比常用的啮齿类动物模型,模型猪具有更高的人类肥胖研究优势,且已有很多利用模型猪开展人类肥胖疾病预防和治疗的研究并取得了一定进展,因此模型猪将会是人类肥胖疾病研究的一个可靠选择。本文为人类肥胖研究的模型动物选择提供了更多思路。
    2021,38(10):83-86, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.017
    摘要:
    猪肺炎支原体是引起猪地方性肺炎的主要病原,流行于世界各地,给养猪业造成重大经济损失。本文综述了猪肺炎支原体的主要传播途径以及引起的临床症状和肺部病变,总结了其主要致病机理,分析了综合控制该疫病的方法。猪肺炎支原体的主要传播途径是与感染猪密切接触,也可通过空气远距离传播,但无垂直传播相关报道;猪肺炎支原体感染的主要临床特征是间歇性、强度可变的干咳,但在与其他病原继发或混合感染后,临床症状和肺部病变可能会加重;猪肺炎支原体主要通过释放黏附素引起纤毛发生病变、死亡,导致上皮细胞受损或脱落从而影响纤毛功能,也能通过产生剧毒的H2O2等代谢产物引发毒性效应;防治该病首先要通过生物安全措施控制猪肺炎支原体的传入,其次是采用抗菌药物进行治疗,最后是通过接种疫苗降低其传播率。本文为猪养殖场做好猪肺炎支原体病防控提供了参考。
    2021,38(10):87-91, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.018
    摘要:
    世界动物卫生组织(OIE)非洲猪瘟(ASF)标准,是OIE成员开展ASF防控应遵循的国际标准,是世界贸易组织(WTO)指定的生猪及生猪产品国际贸易应遵循的准则,对各国ASF防控和监测、应急机制建立和生猪及生猪产品流通贸易具有重要的指导和规范作用。本文梳理了OIE-ASF标准修订历史沿革,从生猪及生猪产品进出口贸易要求、疫病状态、疫病监测、病原灭活等方面介绍了2002版、2008版、2017版和2019版标准的修订情况和具体条款内容。现行2019版ASF标准较2008版增加了安全商品、疫病监测和不同产品中病毒灭活等条款,对世界各国动物产品贸易、ASF防控等方面都有了新要求。为应对这些要求,我国应积极参加OIE标准制修订工作,科学制定我国标准法规,积极开展ASF防控工作,合理建立ASF监测体系和ASF无疫小区。
    2021,38(10):92-97, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.019
    摘要:
    为研制流行性出血病病毒(epidemic hemorrhagic disease virus,EHDV)ELISA 抗体检测试剂盒,用饱和硫酸铵浓缩EHDV灭活病毒作为包被抗原,以EHDV鼠源单克隆抗体作为阻断抗体,商品化的IgG-HRP羊抗鼠二抗作为检测抗体,通过优化检测试剂中各组分含量和反应程序,建立了一种EHDV阻断ELISA抗体检测方法。用研制的试剂盒与ID Screen参考试剂盒分别检测实验室保存的血清样本,结果发现该方法的特异性、敏感性与ID Screen参考试剂盒一致,二者符合率为97.00%。结果表明,研制的EHDV阻断ELISA抗体检测试剂盒可作为EHDV抗体检测的候选试剂盒,代替国外试剂盒使用,从而降低EHDV检测成本,这对该病防控具有重要意义。
    2021,38(10):98-106, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.020
    摘要:
    为建立检测牛疱疹病毒(BHV-1)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛副流感病毒3型(BPIV-3)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)单一或混合感染的荧光PCR检测方法,根据BHV-1 gB基因、BRSV F基因、BPIV-3 M基因和BVDV 5'UTR基因保守区序列分别设计特异性引物和TaqMan荧光探针,经条件优化,成功建立了BHV-1、BRSV、BPIV-3和BVDV的四重荧光PCR检测方法。该方法对牛布鲁氏菌、猪瘟病毒、小反刍兽疫病毒、羊多杀性巴氏杆菌无特异性扩增;对BHV-1、BPIV-3和BVDV的最低检测量均为8.268 copies/μL,对BRSV的最低检测量为82.680 copies/μL;该方法重复性好,CV值为1%~2%。应用本方法检测采自湖南省内某屠宰场的865份样品,结果BHV-1、BRSV、BPIV-3和BVDV等4种病原均有检出,其阳性率分别为0.58%,0.81%,0.23%和0.81%。本研究建立的多重荧光PCR检测方法可同时对BHV-1、BRSV、BPIV-3和BVDV进行检测,为这4种病原的快速诊断和鉴别提供了技术支撑。
    2021,38(10):107-114, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.021
    摘要:
    禽网状内皮组织增生症病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)既可以诱发禽的肿瘤性疾病,又能引起感染禽群免疫抑制,给养禽业带来重大经济损失。REV抗体监测对于该病的诊断、预防和控制具有重要意义。本试验首先通过大肠杆菌表达系统表达了重组REV p30-gp90融合蛋白,随后建立了基于该融合蛋白的REV抗体间接酶联免疫吸附试验(ELISA),并对反应条件进行了优化。结果显示,p30-gp90间接ELISA的灵敏度(1:51 200)是间接免疫荧光法(IFA)(1:6 400)的8倍,与其他常见禽类病毒无交叉反应,且具有良好的批内和批间重复性。对从山东省部分地区养殖场采集的690份血清样品,同时利用p30-gp90间接ELISA和IFA进行检测,发现20.87%的血清样品经间接ELISA检测为阳性,间接ELISA和IFA的总体符合率为96.96%。结果表明,本研究建立的间接ELISA检测方法具有特异性强、敏感性高和重复性好的优势,为REV的快速诊断、流行病学调查和血清学监测提供了技术支持。
    2021,38(10):115-119, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.022
    摘要:
    为建立一种方便、快捷的鸭源鸡杆菌血清抗体诊断方法,通过用鸭源鸡杆菌YT-1株制备抗原,然后免疫健康家兔制备阴阳性血清,建立了鸭源鸡杆菌平板凝集检测方法,并进行特异性试验,确定抗原最佳工作浓度,同时用该方法进行临床样品检测。结果显示:鸭源鸡杆菌染色抗原与鸡源阳性血清产生明显凝集,而与鸡源阴性血清以及鸡大肠杆菌、鸡沙门氏菌、副鸡嗜血杆菌、禽流感病毒、鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒和禽腺病毒等病原的阳性血清均不凝集;当抗原浓度为5×109 CFU/mL时,抗原与血清凝集最佳。结果表明,建立的鸭源鸡杆菌血清抗体平板凝集试验方法具有良好的特异性,可用于开产前后鸡群鸭源鸡杆菌的检测评估及流行病学调查。
    2021,38(10):120-126, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.023
    摘要:
    为建立一种快速、高通量的多重耐药基因检测方法,利用Luminex液态芯片平台,建立了可同时检测17种耐药基因的液态芯片检测方法。该方法对大肠杆菌常见的七大类抗菌药物所对应的17种耐药基因(blaSHV、blaCMY-1、Aph3-IIa-1、aac(6)-Ib-cr、aadA-1、cmlA-1、gyrA、mcr-1、NDM-1、parC、qnrS-1、sul-1、sul-2、sul-3、tetA、tetB、tetX)进行序列分析,随后依次对其设计多重PCR特异性引物,构建特异的阳性质粒作为阳性参比品进行液态芯片检测条件优化,从而进行多重耐药基因液态芯片检测方法的研发。结果显示:成功构建了17种耐药基因的阳性质粒,并建立了两套体系用于检测17种耐药基因。在特异性试验中,两套体系中的检测信号无干扰,具有较高的特异性数值;敏感性试验中,体系一的单一质粒最低检测量为102~104 copies/μL,混合质粒为103~105 copies/μL;体系二的单一质粒最低检测量为102~105 copies/μL,混合质粒为104~106 copies/μL;有效性试验中,液态芯片法与PCR检测结果的Kappa值多在0.60以上,具有高度一致性。结果表明,本研究建立的2套液态芯片检测体系具有高通量、高灵敏和高特异性的优点,可同时对17种耐药基因进行检测,能够达到快速检测的目的。
    2021,38(10):127-131, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.024
    摘要:
    为优化ST悬浮细胞培养条件及其生产猪伪狂犬病病毒的工艺参数,对影响ST悬浮细胞生长的接种细胞初始密度、培养时间和摇瓶转速等工艺参数进行优化比较,对影响猪伪狂犬病病毒增殖的接种细胞初始密度、感染量和培养时间等条件进行优化。结果显示:接种细胞初始密度1.00×106 cells/mL、摇瓶转速140 r/min、悬浮培养48 h时,细胞数量扩增了4倍且细胞活力高;猪伪狂犬病病毒接种时初始细胞密度2.00×106 cells/mL、感染量MOI=1.0、培养60~72 h,毒价可达109.00 TCID50/mL。结果表明,优化后的培养工艺适用于摇瓶中ST悬浮细胞及猪伪狂犬病病毒的培养。本研究为获得高密度ST悬浮细胞和提高猪伪狂犬病病毒繁殖能力提供了试验依据。
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    2017,34(11):89-93, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.024
    [摘要] (2819) [HTML] (0) [PDF 754.31 K] (5466)
    摘要:
    为建立一种快速检测犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒Ⅱ型(CAV-2)和犬副流感病毒(CPIV)的多重PCR方法,参照GenBank中的相关病毒基因序列,分别设计了4对引物,用于特异性扩增CDV H基因、CPV VP2基因、CAV-2 E3基因和CPIV NP基因上的目的片段。通过优化反应条件,建立了同时扩增CDV(410 bp)、CPV(253 bp)、CVA-2(655 bp)和CPIV(868 bp)的多重PCR方法。利用建立的多重PCR方法,对CDV、CPV、CAV-2、CPIV、CDV+CPV+CAV-2+CPIV和犬冠状病毒(CCV)的DNA或cDNA模板进行扩增,发现该方法的特异性良好。利用建立的多重PCR方法与单一PCR方法进行敏感性比较,发现两者敏感性相差10倍,证明多重PCR方法敏感性良好。利用该方法对从北京市采集的30份犬病料样品进行检测,发现CDV阳性率为63.33%(19/30)、CPV阳性率为33.33%(10/30)、CAV-2阳性率为6.66%(2/30)、CPIV阳性率为0(0/30)。检测结果证明建立的多重PCR方法可用于临床诊断。
    2017,34(8):87-91, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.08.023
    [摘要] (2907) [HTML] (0) [PDF 797.21 K] (5293)
    摘要:
    非洲猪瘟是一种跨境动物疫病,对世界养猪业危害严重。目前,该病的流行范围越来越广。为防止该病传入我国,当前急需建立快速、简便、可靠的检测方法。本研究通过分析非洲猪瘟病毒B646L基因保守区域,设计并合成了特异性引物和exo探针,建立了检测非洲猪瘟病毒的实时荧光RPA方法。利用该方法可在20 min内完成检测过程,最低可检测到16拷贝/反应;与猪的其他常见病原核酸无交叉反应;与荧光PCR方法具有相似的灵敏度和特异性;利用该方法对100份国内临床样品进行检测,结果均为阴性。本研究所建立的非洲猪瘟病毒实时荧光RPA检测方法具有简单、快速、敏感性高、特异性强的优点,在临床鉴别诊断、检验检疫和病原监测等方面具有广泛的应用价值。
    2017,34(11):65-69, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.018
    [摘要] (2623) [HTML] (0) [PDF 490.80 K] (5163)
    摘要:
    鹿科动物慢性消耗性疾病是鹿科动物发生的一种致死性神经退行性疾病,属于传染性海绵状脑病的一种。本文从病原学、地理分布、宿主范围、传播方式、环境的重要作用以及人类安全、诊断、防控等方面,对最新研究进展进行了综述,以期对该病的防控提供参考。
    2017,34(11):94-98, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.025
    [摘要] (2569) [HTML] (0) [PDF 720.54 K] (5033)
    摘要:
    为表达山羊痘病毒P32蛋白并研究其免疫原性,构建了含有P32基因的重组表达质粒pET-P32,诱导表达和纯化了P32蛋白;分别运用SDS-PAGE和Western blot,对该蛋白进行了分析和生物活性鉴定;用分析鉴定后的P32蛋白免疫BALB/c小鼠,然后采集小鼠血清,用间接ELISA进行抗体检测;用小鼠脾淋巴细胞增殖试验,检测该蛋白对机体的细胞免疫活性。结果显示:表达纯化的含有GST标签的P32重组蛋白,大小约39 kDa;Western blot显示 P32重组蛋白具有较好的特异性;间接ELISA抗体检测和小鼠脾淋巴细胞增殖试验表明P32重组蛋白具有良好的免疫原性。本试验结果为深入研究P32蛋白的生物学功能以及对山羊痘的诊断与防治奠定了基础。
    2017,34(11):25-28, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.007
    [摘要] (2634) [HTML] (0) [PDF 417.94 K] (4798)
    摘要:
    出境生物物种资源查验是保障国门生物安全,遏制资源流失,促进生态文明建设的重要环节。本文阐述了我国生物物种资源流失及监管现状,分析了出境生物物种资源查验面临的法规不健全、生物物种鉴定能力受限、管控名录缺乏、监管体系缺位等问题,并剖析了问题产生的原因。在此基础之上,提出了对出境生物物种资源查验的对策建议,包括加强法制建设、制定管制物种名录、健全物种资源查验机构、加强研发与人才培养、加强公众宣传等。
    2017,34(11):99-103, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.026
    [摘要] (2592) [HTML] (0) [PDF 988.47 K] (4554)
    摘要:
    金鱼造血器官坏死病毒(Goldfish haematopoietic necrosis virus,GFHNV)是一种可感染金鱼等鲤科鱼类,并可导致其死亡的疱疹病毒。为了快速检测病原,本研究根据GFHNV的主要衣壳蛋白(Major captor protein,MCP)序列中的一段保守基因序列,设计引物和TaqMan探针,建立了GFHNV特异性的实时荧光定量PCR检测方法;并利用PCR反应扩增出的MCP基因,制备了pUC-GFHNV重组质粒作为阳性对照。经试验,该方法检测限最低可达10个拷贝数的目的基因,而且与锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV)、甲鱼虹彩病毒(Softshell turtle iridovirus,STIV)、流行性造血器官坏死病毒(Epizootic haematopoietic necrosis,EHNV)、斑点叉尾鮰病毒(Channel catfish virus,CCV)以及白斑综合症病毒(White spot syndrome virus,WSSV)等5种水生动物病毒无交叉反应。该方法具有简便、快速、敏感、特异等优点,为该病的诊断与病原检测提供了一个重要手段。
    2017,34(11):29-31, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.008
    [摘要] (2718) [HTML] (0) [PDF 390.92 K] (4523)
    摘要:
    本文分析了进境种牛在境外出口隔离场免疫牛病毒性腹泻灭活疫苗后,对该病后续检疫工作的影响:从血清样品中进行病毒分离会受到干扰;对出口隔离场检疫所用的抗原捕捉ELISA几乎没有影响;对种牛在国内进口隔离场检疫及后续检疫时,如使用针对结构蛋白Erns的抗原捕捉ELISA试剂盒,则影响较小,如使用针对非结构蛋白的NS2-3 抗原捕捉ELISA试剂盒,则影响很大;免疫导致无法区分自然感染和免疫反应。进而提出了取消免疫该疫苗的建议,并得到了进出口国政府主管部门的认同并付诸实施。
    2018,35(8):17-22, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2018.08.005
    [摘要] (1991) [HTML] (0) [PDF 882.84 K] (4440)
    摘要:
    为了解浙江省南美白对虾主产区苗种主要病原的携带情况,对杭州、宁波、嘉兴和绍兴4个地区的苗种场开展了病原检测。129批次样品的检测结果显示:有4种病原检出阳性,阳性检出率分别为南美白对虾白斑综合症病毒(WSSV)1.55%、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)20.93%、虾肝肠胞虫(EHP)31.78%、虾血细胞虹彩病毒(SHIV)37.21%,而桃拉综合症病毒(TSV)未有阳性检出。结果表明,SHIV、EHP、IHHNV是浙江省对虾苗种携带的主要病原,需要重点加以防范。从整体分布看,宁波市南美白对虾苗中携带的病原种类最多,且携带率较高,提示宁波市需要加强防控。从苗种来源看,来自福建省虾苗的IHHNV携带率最高,为38.10%;来自海南省和广东省虾苗中存在WSSV感染,检出率分别为2.17%和2.27%;来自广东省虾苗的EHP和SHIV携带率最高,分别为43.48%和41.30%。由于浙江省南美白对虾苗种主要依靠外地输入,而这些输出地区的苗种病原感染率较高,因此浙江省需要加强从这些地区引入苗种的检疫工作。
    2017,34(11):38-41, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.011
    [摘要] (2558) [HTML] (0) [PDF 643.18 K] (4346)
    摘要:
    本文全面分析了我国兽医实验室能力验证计划10余年来的发展轨迹,从多方面、多维度总结分析我国动物检疫领域能力验证计划的实施情况,梳理了我国兽医领域能力验证现状、特点及所存问题,指出了我国兽医领域能力验证缺乏规范化管理的现状。基于目的性、系统性、科学性、兼容性和实用性的构建原则,创造性的提出了兽医实验室能力验证分类方法及兽医实验室能力验证体系表建立的初步设想。
    2017,34(11):4-7, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.002
    [摘要] (2487) [HTML] (0) [PDF 602.71 K] (4327)
    摘要:
    采用RT-PCR及PCR技术,对广西梧州市7个县(市、区)屠宰场2015—2016年送检的1 304份猪组织样品(肺脏、淋巴结、脾脏)进行高致病性蓝耳病病毒(HPRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)核酸检测,对7个规模场送检的70份病死猪组织病料样品(肺脏、淋巴结、脾脏)进行HPRRSV、CSFV、伪狂犬病病毒(PRV)、圆环病毒(PCV)核酸检测。采用ELISA技术,对梧州市7个县(市、区)送检的8 572份血清检测猪瘟免疫抗体,对2 066份血清检测猪蓝耳病免疫抗体。结果显示:HPRRSV、CSFV核酸检测均为阴性;规模场病死猪组织病料的PRV核酸阳性率为14.3%,PCV为57.1%;猪瘟免疫抗体合格率为90.41%,蓝耳病免疫抗体合格率为73.48%。监测结果表明:梧州市流行的生猪高热病主要涉及猪伪狂犬病和猪圆环病毒病2种病毒病;猪蓝耳病和猪瘟的强制免疫,有效控制了该地主要猪病毒性疫病的发生与流行。
    2017,34(3):34-38, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.03.009
    [摘要] (2515) [HTML] (0) [PDF 728.79 K] (4325)
    摘要:
    本文介绍了我国动物源细菌耐药性监测网络的组成和主要内容,详细阐述了其过程控制,包括采样、细菌分离鉴定和耐药性检测、耐药性检测结果汇总分析等,并介绍了我国取得的成就,如建立了动物源细菌耐药性监测技术平台和耐药性细菌资源库、创建了具有自主知识产权的动物源细菌耐药性数据库、摸清了我国动物源细菌的耐药性状况等。针对我国动物源细菌的耐药现状,提出了应对措施,包括规范我国兽用抗菌药物饲料添加剂的使用、加强动物处方药的管理并建立治疗用抗菌药物的分级管理制度、持续开展畜禽细菌耐药性动态监测等。
    2018,35(10):46-49, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2018.10.013
    [摘要] (933) [HTML] (0) [PDF 646.96 K] (4308)
    摘要:
    成都市针对动物卫生监督工作中存在的生产数据模糊、信息化水平低、追溯体系断链等相关问题,通过物联网、大数据、移动互联网等信息技术的交融,全面建成了“成都智慧动监”畜产品质量安全监管系统,使监管数据化、全程可追溯、疫情科学管理和动物卫生监管服务能力显著提升。本文介绍了“成都智慧动监”的建设思路、总体架构、构成要素、运行机制等,并对其持续迭代核心技术、制定标准和规范、推进大数据分析应用和探索市场化服务等发展方向进行了展望,以期为推动动物卫生监督工作方式升级提供参考。
    [摘要] (3939) [HTML] (0) [PDF 2.95 M] (4283)
    摘要:
    为了解河南省郑州市2018年规模猪场的伪狂犬病野毒感染情况,利用gE抗体ELSIA方法,对免疫过猪伪狂犬病gE基因缺失疫苗的36个不同养殖规模的定点监测猪场,进行gE抗体检测。2018年1—12月,共检测血清样品1 057份,检出阳性场27个,场群阳性率为75.0%(27/36);检出阳性样品309份,样品阳性率为29.2%(309/ 1 057)。结果表明,郑州市伪狂犬病野毒感染面较广,流行率较高,存在较高的疫情暴发风险。存栏500头以下规模猪场的gE抗体阳性率(69.8%)是存栏3 000头以上的规模场(19.1%)的3.65倍,表明养殖规模越小,伪狂犬病野毒感染风险越大。利用荧光PCR方法对gE抗体阳性样品进行检测,检出阳性32份,阳性检出率为35.6%(32/90),表明感染猪群的持续带毒、排毒现象较为严重。建议规模化养猪场加强gE基因缺失疫苗免疫和gE抗体检测,及时淘汰阳性猪,同时结合隔离、消毒等综合防控技术,逐步实现猪伪狂犬病的控制与净化。
    2017,34(11):86-88, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.023
    [摘要] (2513) [HTML] (0) [PDF 440.37 K] (4229)
    摘要:
    为确定口蹄疫O-A-Asia1型三价灭活疫苗免疫骆驼的安全性和免疫效果,分别进行了2倍注射剂量和3倍注射剂量的安全性试验和最小免疫剂量试验。结果显示:该疫苗对6月龄以上骆驼安全,无任何毒副反应;适宜的免疫剂量为6月龄以上骆驼每峰3.0 mL。该类型疫苗对骆驼安全,免疫效果良好;一次接种可同时预防O、A、Asia1 3个血清型的口蹄疫。
    2017,34(11):46-48, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.013
    [摘要] (2621) [HTML] (0) [PDF 415.31 K] (4067)
    摘要:
    本文概述了吉林省无疫区建设的基本情况,阐述了吉林省动物卫生监督所在建设免疫无口蹄疫区过程中采取的主要工作措施与取得的成效,并从政府重视、任务分工、宣传培训、督导检查等方面总结了工作体会,以期为无疫区建设省份提供借鉴。
    2017,34(11):60-64, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.017
    [摘要] (2394) [HTML] (0) [PDF 522.36 K] (4056)
    摘要:
    猪乙型脑炎严重危害着人类健康,给世界养猪业造成了极大经济损失。本文从血清学和病原学方面入手,综述了猪乙型脑炎病毒最新实验室检测方法研究进展,以期为该病的预防与控制提供参考。
    [摘要] (2382) [HTML] (0) [PDF 503.28 K] (4027)
    摘要:
    2010—2012年在全国新城疫主动监测中分离并鉴定出6株基因XII型新城疫病毒。这是我国首次发现该基因型病毒。分离到的XII型新城疫病毒全部分布在我国南方地区,多为水禽分离株,仅有1株为鸡源分离株。脑内接种致病指数(ICPI)和分离株F蛋白裂解位点的氨基酸组成证实分离株均为新城疫强毒。进一步的遗传进化分析表明,这6株分离株属于基因XIIb亚型,与南美地区的XII型分离株基因型不同(XIIa亚型)。对于国内新出现的基因XIIb新城疫病毒的来源,仍需要更多的监测数据来证实。目前的监测数据表明,这种在我国新出现的XII型新城疫病毒具有在当地造成地方流行和进一步扩散的风险。
    2017,34(11):70-73, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.019
    [摘要] (2708) [HTML] (0) [PDF 522.55 K] (3998)
    摘要:
    猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type 3,PCV3)为新发传染病病原。2016年美国首次报道了该病的发生与流行。为了解PCV3在我国猪群中的分布与流行状况,本研究建立了PCV3 PCR检测方法。敏感性和特异性试验结果表明,该方法对PCV3的最低核酸检出量为38 pg,可扩增出284 bp的特异性片段。利用建立的PCR方法对从河北省猪场收集的168份疑似样品进行检验,检出阳性样本9份,表明河北猪群存在PCV3感染。
    2017,34(2):101-105, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.02.029
    [摘要] (2503) [HTML] (0) [PDF 1.25 M] (3970)
    摘要:
    核酸适配体(Aptamer)是一类单链短DNA或RNA片段,具有一定的空间结构,对特定靶分子具有亲和力。本研究采用指数富集配体系统进化技术(SELEX),首次筛选出针对鲤春病毒血症病毒(SVCV)的核酸适配体A2和A15,经过荧光PCR、凝胶阻滞和病毒中和实验,证明了其对SVCV具有结合力和抑制作用,在该病的检测和防治方面具有良好的前景。
    2017,34(11):79-81, DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.021
    [摘要] (2583) [HTML] (0) [PDF 509.21 K] (3962)
    摘要:
    为比较3种品牌(A、B、C)伪狂犬病病毒(PRV)gE抗体ELISA检测试剂盒的临床使用效果,应用中和试验来标定伪狂犬病非免疫猪场的180份临床血清样品,同时用3种试剂盒进行检测,并对试剂盒的重复性、敏感性、特异性以及与中和试验结果的符合度等指标进行测定与分析。结果显示:3种试剂盒的批内稳定性均较好,变异系数均小于10%;批间重复性差异较大,变异系数最小者为8.09%,最大者高达21.31%;3种试剂盒的诊断特性良好,敏感性为95.56%~97.78%,特异性为94.44%~100%;各试剂盒检测结果与中和试验结果均完全相符(Kappa值为0.91~0.96)。比较结果表明,3种试剂盒均适用于临床样品的PRV gE抗体检测,其中稳定性及敏感性俱佳的试剂盒C更适用于PRV的持续监测、早期发现、引种检疫及净化效果评估,而特异性与准确性最高的试剂盒B更适用于贵重病畜的诊断淘汰。因此,生产实践中应根据诊断目的合理选择最适试剂盒。
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